具体方法：向改良后Starkey培养基（K2HPO4 0.5g，NH4CI 1.0g ，Na2SO4 10g ，CaCI2•2H2O 0.1g ，MgSO4•7H2O 2.0g，酵母膏 6.0g ，60%的乳酸钠溶液 6ml，蒸馏水1000 ml，pH=7.8）中加入0.2%的刃天青溶液，培养基煮沸后，加入L-半光盐酸盐0.5g，通入高纯氮气驱氧30min，121℃灭菌20min，固体培养基加入16%的琼脂糖。
单独配 3%的FeSO4•(NH4)2 SO4 厌氧
SRB菌株于液体培养基中37℃培养48h 后, 在Olympus COVER-018光学显微镜下革兰氏染色观察。
2.DNB菌
方法同SRB菌，PH值最好在7，
药品：
(NH4 ) 2SO4 3 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, M gSO4•7H2O 0.5g,
Ca (NO3 )2 0.01 g, FeSO4•7H2O 8.0 g, 蒸馏水1 000 mL
121℃灭菌15 m in。
恒温摇床培养箱振荡培养
由于此项操作开始时间较晚，至实习结束，菌落还未完成一个完整周期的培养。
三、水生细菌的计数
1.血球板计数法
取样：先清洗一个容量为100毫升的取样瓶或烧杯。取样前轻轻振荡试管搅拌，待分布均匀后，立即用注射器针管（无菌）取样，取样的量为1毫升。加蒸馏水100倍稀释。
样品放于计数板：放置前必须将血球计数板和盖玻片清洗干净、擦干，不能有油污染和杂质。将血球计数板平放在桌子上，盖好盖玻片；然后把样品瓶轻轻摇动几下，菌分布均匀，并立即用干净的微吸管取样品，迅速把微细吸管放到盖玻片的边缘处，轻压微细吸管的橡皮帽，使样品流入计数板内。注意控制样品流入量，不能过多，过多则流入到沟内；也不能过少，过少则计数时不准确（计数后的数量一般偏少），应充满画线方格及其周边部分。还应注意盖玻片下不能有气泡存在，否则会造成计数不准确。样品吸入血球计数板后，稍停1分钟，待细菌沉降在玻片表面上再在显微镜下进行计数。
计数：计数中央大格的4个角的中格，每个中格有25个小格，逐一计数，4个中格相加共计数100个小格。计数时应从计数框一角开始，在计数框边缘的标本应按"计上不计下、计左不计右"的原则，计数出细菌的总量后，按下式计算出每毫升菌液中的细菌数量：细菌数量＝100个小格的细菌数×4×10000×稀释倍数。
注意每个样品最少重复计数两次，然后取其平均值
#2 895=179(47,35,30,39,28)*5 1595=319(12,30,153,57,67)*5
(895+1595)/2*10000*100=1245*1000000
#8 815=163(50,50,20,32,11)*5 305=61(16,11,12,12,11)*5
(815+305)/2*10000*100=560*1000000
2.MPN法计数
1）称取样品1g，放入90ml无菌水中，振荡，让菌充分分散，然后按十倍稀释法将其制成10-1稀释液。
2）将26支装有培养液的试管（带胶塞，厌氧）按纵3横8的方阵排列于试管架上，第一纵列的3支试管上标以10-2，第二纵列的3支试管上标以10-3……第八纵列的3支管上际以10-9（即采用8个稀释度，3个重复），另外2支试管留作对照。
3） 用无菌注射器针管按无菌操作要求吸取10-1的土壤稀释液各lml放入编号10-2的3支试管中，再从10-2稀
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